Summary. An in vitro microassay for the measurement of Candida albicans hyphal‐form growth inhibition by myelomonocytic cells is described. The assay is rapid, easy‐to‐perform and objective. A Candida strain capable of in vitro dimorphic transition from yeast to hyphal form has been employed. The assay is based on the incorporation of 3H‐glu‐cose by the fungus, the effect being dependent upon the time of pulse, size of the inoculum and concentration of radiolabelled metabolite. In particular, C. albicans hyphal form, obtained by a 3 h incubation in vitro in the presence of 10% fetal calf serum, is co‐incubated with the effector cells. A pulse with 3H‐glucose in water is then performed and the radioactivity incorporated by the residual Candida is taken as an indication of hyphal growth. We found that polymorphonuclear cells, peritoneal macrophages and the cloned GG2EE macrophage cell line significantly inhibited hyphal growth, the effects being time and effector‐to‐target cell ratio dependent. Zusammenfassung. Es wird ein Mikroverfahren in vitro zur Messung der Wachstumshemmung von Candida albicans in der Myzelphase durch Mye‐lomonozyten beschrieben. Der Ansatz ist schnell, leicht in der Ausführung und liefert objektive Re‐sultate. Hierzu wurde ein Candida‐Stamm verwen‐det mit der Fähigkeit, in vitro den dimorphen Pha‐senwechsel von der Hefe‐ zur Myzelphase zu durch‐laufen. Der Ansatz basiert auf dem 3H‐Glucose‐Ein‐bau durch den Pilz. Dieser Einbau ist abhängig von der Expositionszeit, der Inoculum‐Größe und der Konzentration des radioaktiv markierten Metabo‐liten. Hierzu wird die C. albicans‐Myzelphase, er‐halten nach 3 h Bebrütung in vitro in der Gegen‐wart von 10%igem fötalem Kälberserum, mit den Effektorzellen ko‐inkubiert. Dann werden die Hefen der 3H‐Glucose in Wasser ausgesetzt, und die ein‐gebaute Radioaktivität in den Candida‐Zellen wird als Indikator des Hyphenwachstums angesehen. Unsere Ergebnisse zeigen, daß polymorphonukleäre Zellen, Peritonealmakrophagen und die geklonte GG2EE‐Makrophagen‐Zellinie das Hyphenwachs‐tum in Abhängigkeit von der Expositionszeit und dem Effektor/Zielzell‐Verhältnis signifikant hem‐men. Copyright © 1991, Wiley Blackwell. All rights reserved
A rapid Candida albicans hyphal‐form growth inhibition assay: determination of myelomonocytic‐mediated antifungal activity: Schnellverfahren zur Messung der Wachstumshemmung von Candida albicans durch Myelomonozyten‐vermittelte antifungale Aktivität / Scaringi, L.; Blasi, E.; Cornacchione, P.; Bietta, C.; Bistoni, F.. - In: MYCOSES. - ISSN 0933-7407. - 34:3-4(1991), pp. 119-123. [10.1111/j.1439-0507.1991.tb00631.x]
A rapid Candida albicans hyphal‐form growth inhibition assay: determination of myelomonocytic‐mediated antifungal activity: Schnellverfahren zur Messung der Wachstumshemmung von Candida albicans durch Myelomonozyten‐vermittelte antifungale Aktivität
Blasi E.;
1991
Abstract
Summary. An in vitro microassay for the measurement of Candida albicans hyphal‐form growth inhibition by myelomonocytic cells is described. The assay is rapid, easy‐to‐perform and objective. A Candida strain capable of in vitro dimorphic transition from yeast to hyphal form has been employed. The assay is based on the incorporation of 3H‐glu‐cose by the fungus, the effect being dependent upon the time of pulse, size of the inoculum and concentration of radiolabelled metabolite. In particular, C. albicans hyphal form, obtained by a 3 h incubation in vitro in the presence of 10% fetal calf serum, is co‐incubated with the effector cells. A pulse with 3H‐glucose in water is then performed and the radioactivity incorporated by the residual Candida is taken as an indication of hyphal growth. We found that polymorphonuclear cells, peritoneal macrophages and the cloned GG2EE macrophage cell line significantly inhibited hyphal growth, the effects being time and effector‐to‐target cell ratio dependent. Zusammenfassung. Es wird ein Mikroverfahren in vitro zur Messung der Wachstumshemmung von Candida albicans in der Myzelphase durch Mye‐lomonozyten beschrieben. Der Ansatz ist schnell, leicht in der Ausführung und liefert objektive Re‐sultate. Hierzu wurde ein Candida‐Stamm verwen‐det mit der Fähigkeit, in vitro den dimorphen Pha‐senwechsel von der Hefe‐ zur Myzelphase zu durch‐laufen. Der Ansatz basiert auf dem 3H‐Glucose‐Ein‐bau durch den Pilz. Dieser Einbau ist abhängig von der Expositionszeit, der Inoculum‐Größe und der Konzentration des radioaktiv markierten Metabo‐liten. Hierzu wird die C. albicans‐Myzelphase, er‐halten nach 3 h Bebrütung in vitro in der Gegen‐wart von 10%igem fötalem Kälberserum, mit den Effektorzellen ko‐inkubiert. Dann werden die Hefen der 3H‐Glucose in Wasser ausgesetzt, und die ein‐gebaute Radioaktivität in den Candida‐Zellen wird als Indikator des Hyphenwachstums angesehen. Unsere Ergebnisse zeigen, daß polymorphonukleäre Zellen, Peritonealmakrophagen und die geklonte GG2EE‐Makrophagen‐Zellinie das Hyphenwachs‐tum in Abhängigkeit von der Expositionszeit und dem Effektor/Zielzell‐Verhältnis signifikant hem‐men. Copyright © 1991, Wiley Blackwell. All rights reserved
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