Messa a punto di un protocollo per l'estrazione e l'analisi di composti fenolici in varietà di Triticum aestivum L.

Linda Olmi(1), Leonardo Setti(2), Giuseppe Montevecchi(1), Elisabetta Sgarbi*(3) MESSA A PUNTO DI UN PROTOCOLLO PER L’ESTRAZIONE E L’ANALISI DI COMPOSTI FENOLICI IN VARIETÀ DI TRITICUM AESTIVUM L Presso il Centro Interdipartimentale “Biogest-Siteia” dell‟Università degli Studi di Modena e Reggio Emilia è attivo dal 2011 un progetto che prevede la realizzazione di una Banca del Germoplasma per la conservazione e la valorizzazione di cereali, in particolare di varietà di frumento tenero (Triticum aestivum L.). Oltre alla raccolta, alla conservazione e all‟analisi morfologica delle varietà, tra gli scopi della Banca vi è quello di caratterizzare le varietà conservate anche da un punto di vista metabolico. Attualmente la Banca dispone di oltre 150 accessioni, tutte caratterizzate dal punto di vista morfometrico sulla base degli standard internazionali di descrizione del grano (IBPGR 1985). Di recente è stato elaborato un protocollo di estrazione e di analisi della componente fenolica delle cariossidi al fine di rilevare eventuali differenze quali-quantitative tra le accessioni. Dopo la macinazione di cariossidi sane ed integre, l‟estrazione è stata effettuata con una soluzione di etanolo 80%. L‟estratto, portato a secco con evaporatore rotante, è stato in seguito riportato a volume con una soluzione di acqua, etanolo assoluto, acetonitrile, trietilammina 91.9:5.0:3.0:0.1. Gli estratti così ottenuti sono stati separati e quantificati mediante cromatografia liquida con analizzatore di massa a triplo quadrupolo (LC-MS/MS Triplo quadrupolo 6410B - Agilent Technologies) presso il Centro Interdipartimentale Grandi Strumenti (CIGS) dell‟Università di Modena e Reggio Emilia. La colonna utilizzata per le analisi è una RP C18 Poroshell 120 (Phenyl Hexyl, Agilent Technologies). La quantificazione è stata eseguita mediante il metodo della standardizzazione esterna e sono stati determinati la ripetibilità ed i limiti di rilevabilità (LOD) e di quantificazione (LOQ). I campioni, analizzati in triplo, sono stati fatti correre in ordine casuale e per l‟elaborazione dei cromatogrammi è stato utilizzato il Software Quantitative Analysis B.05.00 (Agilent Technologies). Per alcuni fenoli, come acido vanillico, acido trans-ferulico, acido siringico, acido sinapico, acido caffeico,vanillina, acido p-cumarico, acido t-cinnamico e apigenina sono disponibili i dati quantitavi relativi a 33 varietà. Bibliografia citata: IBPGR (1985). Descriptors for Wheat (Revised), Roma, pp. 44. Gli Autori ringraziano la “Fondazione Cassa di Risparmio di Modena” per il finanziamento destinato all‟acquisto del LC-MS/MS Triplo quadrupolo 6410B - Agilent Technologies, Laboratorio Spettrometria di Massa, presso il Centro Interdipartimentale Grandi Strumenti (CIGS) dell‟Università di Modena e Reggio Emilia. Indirizzo Autori: (1) Centro Interdipartimentale BIOGEST-SITEIA, v. Amendola 2, Padiglione BESTA, Reggio Emilia, Italy; (2) Dipartimento di Scienze della vita, Università di Modena e Reggio Emilia, v. Amendola 2, Padiglione BESTA, Reggio Emilia, Italy; (3) Dipartimento di Scienze della vita, Università di Modena e Reggio Emilia, v. Amendola 2 Padiglione BESTA / Centro Interdipartimentale BIOGEST-SITEIA, v. Amendola 2, Padiglione BESTA, Reggio Emilia, Italy Corresponding Author: Elisabetta Sgarbi (elisabetta.sgarbi@unimore.it)